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代谢组学
科研服务
抗体/蛋白
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技术服务:18971263062
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化合物单体
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SARS-CoV-2 Surrogate Virus Neutralization Test Kit(E484K)
项目 |
OD450值 |
结果判断 |
阳性对照 |
< 0.3 |
通过 |
阴性对照 |
>0.9 |
通过 |
五、判定阈值
项目 |
阈值 |
结果 |
检测结果判读 |
中和抗体检测 |
≥20% |
阳性 |
检测到中和抗体 |
<20% |
阴性 |
未检测到中和抗体 |
六、精密度
批内差:CV<8%
批间差:CV<10%
七、稳定性
试剂盒按推荐温度保存6个月,信号强度降低小于 10%。
八、实验细节说明
1. 在试剂盒标签上的有效期内使用,不要与其他厂家的试剂盒混合使用。
2. 如果阴性对照或阳性对照检测OD值超出检测范围,可适当缩短显色时间。
3. 为避免交叉污染,不同标准品、样本、试剂的加样需更换移液枪头,每管试剂使用单独的容器储存。
4. 在孵育过程中贴紧封板膜。
5. 显色液避光保存,临用前15分钟从冰箱取出室温平衡。
6. 浓缩清洗液(20×)需使用去离子水1:20稀释至工作浓度,去离子水不包含在试剂盒中,需实验人员自备。
7. 终止液为酸性溶液,具有轻微腐蚀性,使用时避免接触皮肤、眼、耳、口等暴露部位,如不慎接触,使用大量清水冲洗后观察接触部位反应,如情节严重请及时就医。
8. 试剂盒酶标板条可按需拆卸使用,已开封的试剂盒建议在1个月内使用,未开封的试剂盒所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存,收到试剂盒后请将阴性对照、阳性对照、检测溶液 A以及 96 孔板保存于-20℃,其余试剂请置于 4 ℃保存备用。
九、常见问题解决指南
问题 |
可能原因 |
解决方案 |
|
阳性质控读数低或者异常 |
检测溶液A和预包板失活 |
a. |
增加反应时间或检测试剂浓度以补偿可能丧失的活性 |
仪器设置错误 |
a. a.
|
检查仪器设置 |
|
b. |
提前一小时预热酶标仪 |
||
加样错误 |
a. |
检查加样步骤 |
|
试剂过早提前准备 |
a. |
确保工作液现配现用 |
|
温度不稳定
|
a. |
孵育时间和温度参见说明书,避免反复冻融
|
|
读数背景高 |
样品中含有抑制剂
|
a. |
加入空白孔 |
b. |
保证DMSO < 1% |
||
洗涤不完全 |
a. |
增加洗涤次数和洗液量 |
|
缓冲液样品污染、降解
|
a. |
确保正确准备,使用和存储了缓冲液和样品
|
|
读数不稳定 |
移液或稀释方法不一致 |
a. |
校正移液器
|
b.
|
准备预混液以减少移液不一致 |
||
c. |
设置平行孔以获得更准确的结果 |
||
孔中有气泡 |
a. |
轻震酶标板以去除气泡
|
|
读数过高 |
a. |
调整样品浓度以达到最佳信号强度。
|
|
b. |
孵育时间调整至45分钟
|
||
试剂和样品混合不充分 |
a. |
确保试剂与样品完全混合
|
|
显色不完全 |
缓冲液残留或污染
|
a. |
阴性对照中的颜色应在添加TMB底物后10秒钟内出现。 如未按上述时间显色可考虑以下情况: a.在添加TMB之前确保没有污染或残留的缓冲液 b.延长TMB孵育时间到15分钟 |
样品名称 |
规格 |
描述 |
推荐储存条件 |
预包板 |
1 板 |
96孔聚苯乙烯微孔板(12列*8孔),预包被RBD(E484K)蛋白。 |
密封状态放置于-20℃保存。 |
阳性对照 |
1 管 |
12μL /管阳性对照,临用前用样本稀释液1:100 稀释至工作浓度。 |
放置于-20℃保存。 |
阴性对照 |
1 管 |
60μL /管阴性对照,临用前用样本稀释液1:10 稀释至工作浓度。 |
放置于-20℃保存。 |
检测溶液A
|
1 管 |
12μL/管-HRP标记 ACE2 蛋白(含防腐剂),临用前用检测溶液稀释液1:2000稀释至工作浓度。 |
放置于-20℃保存。 |
样本稀释液 |
1 瓶 |
25 mL稀释液(含防腐剂),用于待测样本的稀释。 |
放置于4℃保存。 |
检测溶液稀释液 |
1 瓶 |
25 mL稀释液(含防腐剂),用于检测溶液A的稀释。 |
放置于4℃保存。 |
浓缩清洗液 |
1 瓶 |
25 mL (20×)浓缩清洗液(含防腐剂),临用前用去离子水1:20稀释至工作浓度。 |
放置于4℃保存。 |
显色液 |
1 瓶 |
12 mL TMB(四甲基联苯胺)。 |
放置于4℃保存。 |
终止液 |
1 瓶 |
6 mL 。 |
放置于4℃保存。 |
封板膜 |
3 片 |
用于实验中封闭酶标板。 |
放置于常温保存。 |